• 常用滅菌方法概述

    2011-02-28

    常用滅菌方法概述
    滅菌常用的方法有化學試劑滅菌、射線滅菌、干熱滅菌、濕熱滅菌和過濾除菌等。可根據不同的需求,采用不同的方法,如培養基滅菌一般采用濕熱滅菌,空氣則采用過濾除菌。

    熱滅菌法
    熱滅菌法利用壓力蒸汽滅菌器高溫使微生物細胞內的一切蛋白質變性,酶活性消失,致使細胞死亡。通常有干熱、濕熱和間歇加熱滅菌等法。

    干熱滅菌
    直接利用火焰將微生物燒死(如燒接種環、載玻片和試管口等)。不能用火焰滅菌的物品則利用熱空氣滅菌,將物品放在烘箱中加熱到160~170℃,持續90分鐘,此法適用于玻璃、金屬和木質的器皿。

    濕熱滅菌
    以沸水、蒸氣和蒸氣加壓滅菌。巴氏滅菌法就是濕熱滅菌,此法有兩種方式,①低溫長時間處理:在61.7~62.8℃下處理30分鐘;②高溫短時間處理:在71.6℃或略高溫度下處理15分鐘。在上述諸法中,以蒸氣加壓滅菌效果最好,可用常壓蒸氣滅菌,也可在高壓蒸氣鍋中(一般使用1千克/厘米2)滅菌,其蒸氣溫度可達121℃,能將耐熱的芽孢在30分鐘內全部殺死。但對某些易被高壓破壞的物質,如某些糖或有機含氮化合物,宜在0.6千克/厘米2壓力下(110℃)滅菌15~30分鐘。

    間歇滅菌
    間歇滅菌連續3天,每天進行一次蒸氣滅菌的方法。此法適用于不能耐 100℃以上溫度的物質和一些糖類或蛋白質類物質。一般是在正常大氣壓下用蒸氣滅菌 1小時。滅菌溫度不超過100℃,不致造成糖類等物質的破壞,而可將間歇培養期間萌發的孢子殺死,從而達到徹底滅菌的目的。

    輻射滅菌
    輻射滅菌在一定條件下利用射線進行滅菌的方法。較常用的有紫外線,其他還有電離輻射(射線加快中子等)。波長在25000~80000納米之間的激光也有強烈的殺菌能力,以波長26500納米最有效。輻射滅菌法僅限于某一定材料,因所需設備復雜,難于廣泛使用。

    滲透壓滅菌
    滲透壓滅菌利用高滲透壓溶液進行滅菌的方法。在高濃度的食鹽或糖溶液中細胞因脫水而發生質壁分離,不能進行正常的新陳代謝,結果導致微生物的死亡。

    化學試劑滅菌
    大多數化學藥劑在低濃度下起抑菌作用,高濃度下起殺菌作用。常用5%石炭酸、70%乙醇和乙二醇等。化學滅菌劑必須有揮發性,以便清除滅菌后材料上殘余的藥物。

     

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